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关键词
慢病毒介导的解偶联蛋白-2基因差异表达对人脐静脉内皮细胞增生及凋亡的影响
【作者】
沈胤忱,陈凤娥,孙涛
【作者单位】
上海交通大学附属第一人民医院眼科
【出处】
中华眼底病杂志
【年份】
2017
【卷号】
第33卷 第1期
【页码】
52-56
【关键词】
内皮细胞/病理生理学 细胞增殖 细胞凋亡 基因表达 慢病毒感染
【ISSN】
1005-1015
【分类号】
R774.1;|R329.28
【摘要】
目的:观察解偶联蛋白-2(UCP-2)基因差异表达对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增生及凋亡的影响。方法构建UCP-2 rs660339位点碱基是胞嘧啶(C)或胸腺嘧啶(T)的慢病毒载体UCP-2C、UCP-2T。将HUVEC分为UCP-2C组、UCP-2T组、阴性对照(NC)组,分别转染UCP-2C、UCP-2T、无意义阴性病毒。荧光显微镜观察各组HUVEC病毒感染效率;实时定量聚合酶链反应检测各组HUVEC UCP-2 mRNA表达;细胞计数试剂盒、流式细胞仪检测各组HUVEC增生、凋亡情况;蛋白免疫印迹法、激光共聚焦显微镜检测各组HUVEC B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白的表达及荧光强度。结果各组HUVEC病毒感染效率均>80%。UCP-2C组、UCP-2T组HUVEC UCP-2 mRNA表达较NC组显著增高,差异有统计学意义(F=29.183, P=0.001)。目的病毒感染后48、72、96 h,UCP-2C组、UCP-2T组HUVEC增生显著高于NC组,差异有统计学意义(F=15.970、16.738、5.414,P=0.004、0.004、0.045)。感染后72 h,与NC组比较,UCP-2T组、UCP-2C组HUVEC凋亡率均降低,差异有统计学意义(F=277.138,P=0.000);UCP-2T组HUVEC凋亡率较UCP-2C组低(P=0.003)。UCP-2T组、UCP-2C组HUVEC Bcl-2蛋白表达显著高于NC组,差异有统计学意义(F=425.679,P=0.000);UCP-2T组HUVEC Bcl-2蛋白表达高于UCP-2C组(P=0.002)。UCP-2T组、UCP-2C组HUVEC Bcl-2蛋白荧光强度显著高于NC组,差异有统计学意义(F=11.827,P=0.008);UCP-2T组、UCP-2C组之间HUVEC Bcl-2蛋白荧光强度差异无统计学意义(P=0.404)。结论 UCP-2 rs660339位点差异表达可能影响HUVEC增生及凋亡;UCP-2T较UCP-2C抑制凋亡作用更显著。
【文献类型】
中文期刊
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