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  • 快速获得和纯化骨髓基质干细胞的方法

  • 【作者】周佳,沈尊理,金羽青,刘伟,沈华
  • 【出处】上海交通大学学报·医学版
  • 【年份】2008
  • 【卷号】第28卷 第2期
  • 【页码】P228-231
  • 【关键词】骨髓基质干细胞  纯化  流式筛选  复合胶原酶
  • 【ISSN】0258-5898
  • 【分类号】R329
  • 【摘要】目的 研究在体外快速获得骨髓基质干细胞及纯化的方法。方法 采用流式细胞仪筛选法获得CD45(上标 -)、CD90(上标 +)原代细胞,复合胶原酶差速消化逐级传代、纯化;对第3代(P3代)细胞进行脂肪细胞、软骨细胞、骨细胞三向诱导;2~4周后,分别行oil red\'O、Safranin\'O和茜素红染色,倒置显微镜下观察诱导结果。结果 经流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化,传代至P3代,细胞形态已呈现均一性。向脂肪细胞诱导后第4周,oil red\'O染色见细胞内大量红染的脂滴;向软骨细胞诱导后第4周,Safranin\'O染色见多数切片呈阳性,细胞团块中存在大量软骨特异性的陷窝样结构;向骨细胞诱导后第4周,茜素红染色发现肉眼可见广泛散在的红色阳性钙结节。结论 本研究所采用的流式细胞仪初筛和复合胶原酶差速消化法,可快速获得高纯度的骨髓基质干细胞。
  • 【文献类型】中文期刊

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